默克 Supelco 24856 在固相萃取裝置與收集管流體連接中的防漏應用方案
上海儀器網 / 2025-09-30
一、方案背景與目的?
在固相萃取（SPE）實驗中，萃取裝置與收集管的流體連接密封性直接影響樣品回收率與實驗精度。若連接部位漏液，不僅會導致目標組分損失，還可能污染實驗臺面、干擾后續檢測。默克 Supelco 24856 凸式 Luer 緊固件采用精密螺紋結構與高彈性密封材質，適配標準 Luer 接口，可實現萃取裝置（如 SPE 柱、萃取盤支架）與收集管（離心管、容量瓶）的緊密連接，有效解決傳統連接方式（如直接套接）易漏液的問題。本方案旨在通過標準化操作，利用該緊固件構建防漏連接體系，保障 SPE 實驗中流體傳輸的穩定性與樣品的完整性。?
二、實驗原理?
默克 Supelco 24856 凸式 Luer 緊固件的核心防漏原理基于 “雙重密封設計”：一是緊固件的凸式 Luer 接口與萃取裝置、收集管的凹式 Luer 接口精準匹配，通過錐面貼合形成初級密封；二是緊固件內置的丁腈橡膠密封圈，在螺紋擰緊過程中受擠壓變形，填充接口間隙，形成次級密封。同時，緊固件的聚丙烯材質具備耐化學腐蝕性（兼容甲醇、乙腈等常用 SPE 溶劑）與機械穩定性（反復使用不易變形），可在 1-50mL/min 的常規 SPE 流速范圍內，維持連接部位無漏液，確保樣品全部流入收集管。?
三、實驗材料與設備?
1. 實驗材料?
- 核心耗材：默克 Supelco 24856 凸式 Luer 緊固件（規格：適配 10-50mL 收集管，每包 50 個）；?
- SPE 相關耗材：固相萃取柱（如 C18 柱，500mg/6mL）、固相萃取裝置（帶負壓控制模塊）、15mL 無菌離心管（收集管，帶 Luer 接口）、0.22μm 水系濾膜；?
- 試劑：甲醇（色譜純，用于 SPE 柱活化）、超純水（電阻率≥18.2MΩ?cm，用于平衡與洗脫）、10μg/mL 羅丹明 B 標準溶液（用于防漏驗證，紅色易觀察）。?
2. 實驗設備?
- 固相萃取真空裝置（帶流量調節閥）、電子天平（精度 0.1mg，用于樣品稱重）、移液槍（1mL/10mL）、渦旋振蕩器、紫外可見分光光度計（用于羅丹明 B 濃度檢測）。?
四、實驗操作流程?
1. 連接前準備與部件檢查?
- 取出默克 Supelco 24856 緊固件，檢查外觀：確認螺紋無破損、密封圈無變形或脫落（若密封圈老化，需及時更換同型號配件）；?
- 清潔萃取裝置出口接口與收集管入口接口：用無塵布蘸取少量甲醇擦拭，去除殘留雜質或油污，避免影響密封效果；?
- 按實驗需求組裝固相萃取裝置：將 SPE 柱固定在裝置支架上，確保 SPE 柱出口垂直向下，與收集管位置對齊。?
2. 緊固件防漏連接操作?
- 第一步：連接緊固件與收集管：手持 24856 緊固件，將其凸式 Luer 接口插入 15mL 離心管的 Luer 入口，順時針旋轉緊固件螺紋套（力度適中，直至手感阻力明顯增加，約旋轉 3-4 圈），確保緊固件與收集管緊密連接，無松動；?
- 第二步：連接緊固件與萃取裝置：將已連接收集管的緊固件另一端凸式接口，對準 SPE 柱出口的凹式 Luer 接口，緩慢插入后，順時針旋轉萃取裝置出口的固定螺母（與緊固件螺紋匹配），直至螺母與緊固件貼合，此時完成 “萃取裝置 - 緊固件 - 收集管” 的完整連接；?
- 第三步：負壓測試：打開固相萃取真空裝置，調節負壓至 0.05MPa（常規 SPE 操作負壓），保持 5 分鐘，觀察連接部位（緊固件與萃取裝置、緊固件與收集管接口處）是否有液滴滲出或氣流聲，若無異常則進入下一步。?
3. SPE 實驗流體傳輸驗證?
- 用移液槍吸取 5mL 甲醇，緩慢注入 SPE 柱，開啟真空裝置，調節流速至 1mL/min，觀察流體是否沿 “SPE 柱 - 緊固件 - 收集管” 順暢流動，連接部位無漏液；?
- 待甲醇完全流出后，再依次注入 5mL 超純水（平衡）、5mL 羅丹明 B 標準溶液（上樣）、5mL 超純水（淋洗）、5mL 甲醇（洗脫），全程保持流速 1mL/min，每一步均需觀察連接部位密封狀態，確保無漏液；?
- 收集全部洗脫液，標記為 “防漏連接組”；同時設置 “無緊固件直接連接組”（SPE 柱出口直接插入收集管），按相同步驟操作，作為對照。?
4. 連接后拆卸與清潔?
- SPE 實驗結束后，先關閉真空裝置，待負壓歸零后，逆時針旋轉萃取裝置出口螺母，取下收集管與緊固件的組合體；?
- 再逆時針旋轉緊固件，將其與收集管分離，用超純水沖洗緊固件內外壁，去除殘留溶劑，晾干后放入潔凈密封袋中，可重復使用（建議重復使用不超過 5 次，避免密封圈老化）；?
- 收集管按實驗要求處理（如樣品檢測、廢液處理），SPE 柱按危廢規范丟棄。?
五、關鍵注意事項?
- 力度控制：旋轉緊固件或固定螺母時，不可過度用力（扭矩不超過 5N?cm），否則可能導致接口變形或密封圈損壞，反而引發漏液；?
- 接口適配：24856 緊固件僅適配標準 Luer 接口（ISO 80369-1 標準），使用前需確認萃取裝置與收集管接口規格，非標準接口需更換適配配件；?
- 溶劑兼容性：雖緊固件耐多數有機溶劑，但避免接觸強腐蝕性試劑（如濃硝酸、氫氟酸），若接觸需立即清洗，防止材質損壞；?
- 批量使用檢查：若同時處理多組樣品，每組連接后均需進行負壓測試，不可僅抽查，避免因個別緊固件瑕疵導致漏液。?
六、防漏效果驗證與分析?
- 視覺觀察驗證：對比 “防漏連接組” 與 “直接連接組”：直接連接組在洗脫步驟中，SPE 柱出口與收集管接口處出現明顯液滴滲漏（約損失 5%-8% 洗脫液）；防漏連接組全程無漏液，流體全部流入收集管；?
- 濃度檢測驗證：用紫外可見分光光度計檢測兩組洗脫液中羅丹明 B 濃度（檢測波長 550nm）：防漏連接組濃度為 9.8±0.1μg/mL，回收率 98%；直接連接組濃度為 9.1±0.2μg/mL，回收率 91%，說明 24856 緊固件可有效減少目標組分損失；?
- 重復使用驗證：將同一緊固件重復使用 5 次，每次均進行漏液測試與回收率檢測，結果顯示回收率穩定在 97%-99%，連接部位無漏液，表明緊固件重復使用性能良好。
